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  • 剛果紅培養基的配方及原理

    2025-09-22 纖維素剛果紅培養基用于纖維素分解菌的分離和鑒別,纖維素分解菌周圍有紅色分解圈。剛果紅培養基的配方:硝酸鈉1.0磷酸氫二鈉1.2磷酸二氫鉀0.9硫酸鎂0.5氯化-鉀0.5酵母浸出粉0.5酸水解酪蛋白0.5剛果紅0.2纖維素粉5.0瓊脂15.0pH值7.0±0.125℃剛果紅培養基的用法:稱取本品25.3g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。纖維素剛果紅培養基篩選菌種的原理:1、剛果紅可以跟大分子多糖牢固結合。2、纖維素是大分子多...
  • 活性氧檢測試檢測的工作流程步驟

    2025-09-10 活性氧檢測試檢測的工作流程步驟活性氧檢測試檢測流程:從探針加載到信號輸出探針加載(細胞預處理)步驟:將細胞接種于培養板(如96孔板),待貼壁后更換無血清培養基(避免血清干擾)。加入終濃度為5-20μM的探針(如DCFH-DA),37℃孵育20-30分鐘。關鍵點:探針濃度需優化:過高導致背景噪聲,過低降低靈敏度。避光操作:熒光探針易被光淬滅,需用錫箔紙包裹培養板。ROS誘導(刺激處理)目的:人為提高細胞內ROS水平,模擬病理或應激狀態。常用刺激物:氧化劑:H?O?(100-50...
  • RNA的提取方法大總結

    2025-09-02 這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理:使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性,經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質,進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而DNA與蛋白質在上清中。使用這種方法,不但能得到高質量的RNA,而且能同時分離出細胞染色體DNA.本法對于冷凍時間長、細胞質和細胞核不易分離的組織標本以及富含RNA酶的組織細胞(如胰腺)的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質量好和成功率高,已成為提取哺乳動物細...
  • 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項

    2025-09-02 在分子生物學實驗中,我們通常需要分離純化特定分子量的DNA片段,用于接下來的實驗,比如酶切、連接的工作。下面主要介紹從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項,其主要原則有兩項:1、去除DNA樣品中的雜質:瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,其中含有較多的酸根和羥基多糖。目前大多數級別的瓊脂糖中含有硫酸酯多糖,這種物質能抑制基因克隆中使用的多種工具酶的活性,如DNA限制性內切酶、連接酶等,在回收DNA時應盡量減少這些物質的污染。不管用哪種方法進行回收DNA,都會用到2.5mol/L...
  • 幾種感受態細胞的用途、基因型和特點

    2025-09-02 1、DH5菌株用途:克隆菌,用于分子克隆、質粒提取。基因型:supE44△lacU169(?80lacZ△M15)hsdR17recAlendAlgyrA19thi-1relAl特點:一種用于鋪制與培養質粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的產物可與pUC載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現α互補,可用于藍白斑篩選。recAl和endAl的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒的提取。2、TOP-10菌株用途:克隆菌,用于分子克隆,質粒提取。基因型:F_m...
  • 核酸電泳之聚丙烯酰氨凝膠電泳

    2025-09-02 核酸電泳,想必大家耳熟能詳的就是瓊脂糖凝膠電泳了。今天我們要來講講另外一個跑核酸的方法--聚丙烯酰氨凝膠電泳。對于聚丙烯酰氨凝膠電泳,想必大家第一反應是蛋白質的電泳,再就是伯樂的電泳設備了。是的,蛋白電泳和伯樂電泳設備都是我們熟悉的。來看看DNA的聚丙烯酰氨凝膠電泳吧。看看膠的配置有什么不同呢?20%的變性聚丙烯酰胺凝膠8ml;尿素3.36g,加入45%丙烯酰胺溶液3.56ml,5XTBE1.6ml,加熱是尿素溶解,加水至8ml,將兩者混勻后冷卻至室溫。再加入3-6ul的TE...
  • 提取DNA的方法總結與比較

    2025-09-02 dna提取是一項經常要做的實驗,下面我們就總結了四種dna提取方法并做詳細說明和比較。一.濃鹽法提取dna:A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的氯仿一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯...
  • 索萊寶試劑盒提取植物dna步驟

    2025-09-01 試劑盒提取植物dna已經獲得廣泛應用。各個生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產品。索萊寶作為國內生化試劑供應商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當然是以索萊寶產植物基因組dna提取試劑盒產品為例。使用前先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、植物組織預處理:取新鮮植物組織(不超過100mg)或干重組織(不超過20mg),于液氮中充分研磨至細粉狀,讓液氮自然揮發。2、將研磨好的植物...
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